附件 10 体外皮肤变态反应 氨基酸衍生化反应试验方法 In Chemico Skin Sensitisation: Amino acid Derivative Reactivity Assay (ADRA) 1 范围 本方法规定了氨基酸衍生化反应试验方法的基本要求和方法。 本方法适用于已知单一组分、 已知组成成分的多组分 化妆品用原料潜在致敏性的评价 。 2 试验目的 预测和评价化妆品用化学原料是否具有潜在皮肤致敏性。 3 定义 3.1 氨基酸衍生物消耗百分比 Percent Amino acid Derivative Depletion 与溶剂对照相比，受试物消耗氨基酸衍生物的程度。 3.2 共洗脱 Co-elution 受试物在 281 nm 处吸收显著 ，并与氨基酸衍生物保留时间相同或色谱峰部分重叠 ，干扰 氨基酸衍生物定量分析。 4 试验原理 有致敏性的受试物与 N- （ 2-（ 1-萘基 ）乙酰基 ）-L- 半胱氨酸 （ NAC ）和 N- （ 2-（ 1-萘基 ） 乙酰基） -L- 赖氨酸（ NAL ）模拟的皮肤蛋白进行反应，消耗氨基酸衍生物。测定衍生物的 量，计算氨基酸衍生物消耗百分比，从而判断受试物是否具有皮肤致敏性。 5 试验材料与试剂 5.1 氨基酸衍生物片段与纯度 N- （ 2-（ 1-萘基）乙酰基） -L- 半胱氨酸（ NAC ）：分子式 C15H15NO 3S，分子量 289.35 ， 纯度：＞ 98% 。 N- （ 2-（ 1-萘基）乙酰基） -L- 赖氨酸（ NAL ）：分子式 C18H22N2O3，分子量 314.38 ，纯 度范围：＞ 98% 。 图 1 NAC （左）和 NAL （右）的结构式 5.2 阳性对照与受试物的配制