体内彗星试验 In Vivo Mammalian Alkaline Comet Assay （征求意见稿） 1 范围 本规范确定了体内彗星试验的基本原则、要求和方法。 本规范适用于化妆品原料的遗传毒性检测。 2 规范性引用文件 OECD Guideline for the testing of chemicals (TG 489, Adopted: 26 September 2014) OECD No. 195: Report of the JACVAM Initiative International Pre-validation Studies of the in vivo Rodent Alkaline Comet Assay for the Detection of Genotoxic Carcinogens. Jul. 15, 2014. OECD No. 196: Report of the JACVAM Initiative International Validation Studies of the in vivo Rodent Alkaline Comet Assay for the Detection of Genotoxic Carcinogens. Jul. 15, 2014. ICH S2 (R1): Guidance on genetoxicitytesting and data interpretation for pharmaceuticlesintended for human use, Nov. 9, 2011. 3 定义 3.1 碱性单细胞凝胶电泳：在单个细胞或细胞核水平检测 DNA损伤的一种敏感技术。 3.2 彗星：经过电泳后细胞核的形状，形似彗星。细胞核部分形成彗星头部，在电场力 的作用下脱离细胞核的 DNA片断形成彗尾。 3.3 “ 刺猬状 ”细胞：显微图像下由小或模糊不清的头以及大的弥漫性尾组成的细胞。 3.4 尾部 DNA 含量：反应总强度（彗头与彗尾之和）中彗星的强度。可反应 DNA片 断的数量，用百分比表示。 3.5 最大耐受剂量：试验期内引起动物产生轻微毒性效应的最高剂量，在这个剂量下， 动物产生明显的临床体征，如异常行为或反应，轻微的体重下降或靶组织细胞毒性，但 是并不会引起死亡或痛苦。 4 原理 DNA 双螺旋结构在强碱性溶液中（ pH>13）会松弛，在电场力的作用下，正常的 DNA